動物癥狀觀察：

表現(xiàn)為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個(gè)月后死亡。

實(shí)驗(yàn)中涉及動物的操作程序已經(jīng)得到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究所實(shí)驗(yàn)動物使用與管理委員會的批準(zhǔn)(ILAS-GC-2012-001)。

TAC重建是誘導(dǎo)心肌肥厚和心衰的常用方法，其機(jī)制是主動脈經(jīng)結(jié)扎重建后，心臟左室負(fù)荷增加，心肌發(fā)生代償性肥厚反應(yīng)。TAC誘導(dǎo)的心肌肥厚模型可重復(fù)性強(qiáng)，并且其誘導(dǎo)的模型呈現(xiàn)漸行性心衰過程，所以應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要，選擇重建小鼠不同的發(fā)展時(shí)期作為相關(guān)心臟疾病研究的模型。

1） 術(shù)后1周，經(jīng)超聲多普勒檢測小鼠IA及LCCA血流強(qiáng)度，IA/LCCA比值與術(shù)后4周時(shí)小鼠舒張期左室后壁厚度（LV posterior wall at end-diastole, LVPWD）呈線性相關(guān)（LVPWD=0.4252㏑(IA/LCCA) – 0.1748），即當(dāng)IA/LCCA>5.9時(shí)，TAC小鼠LVPWD顯著增厚（P<0.05），即此TAC小鼠符合心肌肥厚模型入選標(biāo)準(zhǔn)（圖1-2）。

注：A.Sham組小鼠主動脈弓處B型超聲截圖，紅色橢圓形區(qū)域?yàn)槔碚撋辖Y(jié)扎動脈重建處，黃色箭頭指示為IA，綠色箭頭指示為LCCA，藍(lán)色箭頭指示為左鎖骨下動脈LSA；B. 多普勒檢測Sham組小鼠IA血流；C. 多普勒檢測Sham組小鼠LCCA血流；D. TAC組小鼠主動脈弓處B型超聲截圖，紅色箭頭指示結(jié)扎線位置；E.多普勒檢測TAC組小鼠IA血流；F. 多普勒檢測TAC組小鼠LCCA血流。

圖1. B型超聲及多普勒檢測小鼠動脈重建情況.

Note: A. Representative B-mode echocardiographicimages of aortic arch on Sham mice, the red round is reconstruction position, yellow arrowis IA, green arrow is LCCA, blue arrow is LSA; B. Doppler analysis of IAflow on Sham mice;C. Doppler analysis of LCCA flow on Sham mice; D. Representative B-modeechocardiographic images of aortic arch on TAC mice, the red arrow point theposition of ligature wire; E. Doppler analysis of IA flow on TAC mice; F.Doppler analysis of LCCA flow on Sham mice.

Fig. 1Analysis of aortareconstruction by B-mode and Doppler analysis

注：IA/LCCA，無名動脈/左頸總動脈血流比值；LVPWD，左室后壁厚度.

圖2. 術(shù)后1周IA/LCCA與術(shù)后4周LVPWD相關(guān)性分析

Note: IA/LCCA,innominate artery flow/left common carotid artery flow; LVPWD, left ventricle posterior wall at end-diastole.

Fig.2 Relevanceanalysis between IA/LCCA ratio 1 week and LVPWD4 weekafterreconstruction

2） TAC小鼠在術(shù)后2-6周內(nèi)呈現(xiàn)代償性肥厚，此時(shí)期小鼠可作為心肌肥厚相關(guān) 研究的理想模型。具體表型：心室壁增厚（術(shù)后4周時(shí)，LVPWD增加36.7%（TAC versus Sham）），心肌收縮力增強(qiáng)，全心增大（HW/BW增加42.9% （TAC versus Sham）），心肌細(xì)胞排列不齊，纖維化增高。

3） TAC小鼠在術(shù)后8-10周，心臟功能失代償并以時(shí)間依賴的方式逐漸發(fā)展為心衰。具體表型：心室擴(kuò)張，室壁變薄，心肌收縮力下降，心肌細(xì)胞出現(xiàn)斷裂溶解。經(jīng)Spss16.0軟件Kaplan-Meier curves分析至術(shù)后8周時(shí)C57BL/6J小鼠經(jīng)重建后，其生存率為85.0% (n=40)，而假手術(shù)組小鼠的生存率為96.4% (n=28) (P=0.128)（圖3）。

注：Spss16.0軟件分析至術(shù)后8周時(shí)，TAC組小鼠生存率為85.0% (n=40)，而Sham組小鼠的生存率為96.4% (n=28)。

圖3 重建小鼠生存率分析

Note：The survival rate was 85.0% (n=40) of TAC group and 96.4% (n=28) of Sham group till 8 weeks afterthe construction analysed by SPSS 16.0 software.

Fig. 3 Survival analysis onconstruction mice

1）小鼠經(jīng)麻醉備皮，固定于手術(shù)操作板上；

2）小鼠經(jīng)口氣管插管連至呼吸機(jī)（頻率為125-150次/分鐘）；

3） 上起咽部，切口開至第二肋間隙行開胸手術(shù)；

4） 分離胸腺及主動脈外包繞脂肪，于無名動脈（innominateartery (IA)，即頭臂動脈干(brachiocephalictrunk)）和左頸總動脈（leftcommon carotid artery, LCCA）間主動脈弓下備線并打活結(jié)備用，拉活結(jié)將27G平針頭和主動脈系緊，此時(shí)即獲得理論直徑約為0.4mm的無名動脈遠(yuǎn)端主動脈弓重建血管。

5） 縫合胸骨及皮膚，待小鼠恢復(fù)自主呼吸后撤氣管插管；

6）小鼠置于鼠籠內(nèi)恢復(fù)俯臥位，注意保暖，如呈現(xiàn)脫水現(xiàn)象可腹腔注射生理鹽水。

心肌肥厚是心臟功能從代償期轉(zhuǎn)向失代償?shù)年P(guān)鍵階段，是心力衰竭的重要病理生理基礎(chǔ)，主要包括生理性肥厚和病理性肥厚。心肌肥厚是導(dǎo)致臨床心血管疾病的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素，并可使得心血管病人死亡率至少提高兩倍。心肌肥厚主要發(fā)生在長期壓力負(fù)荷過重的情況下，心肌總量增加，收縮力加強(qiáng)，但長期功能代償會最終導(dǎo)致心肌收縮力減退，失代償并轉(zhuǎn)為心衰。臨床癥狀包括呼吸困難，胸痛，乏力，心悸，晚期出現(xiàn)心力衰竭。